ELISA實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣，操作者們所犯的問題也各有不同。近日，南京大學(xué)周老師到我司何咨詢問道：為什么ELISA標(biāo)準(zhǔn)品會出現(xiàn)“溢值"的現(xiàn)象呢？看到問題后，何立即轉(zhuǎn)到技術(shù)部，隨后上海恒遠(yuǎn)公司技術(shù)部給周老師去，解析造成ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品溢值的原因：
    ① 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋。
    ② 孵育時(shí)間/溫度不正確。
    ③ 在孵育時(shí)為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物：在孵育時(shí)需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物，以防止液體蒸發(fā)或孵育期間的污染。每個試劑盒內(nèi)均有足夠數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物。
    ④ 檢測波長不正確：要保證分光光度劑的檢測波長是正確的。
    ⑤ TMB底物的顯色時(shí)間過長：請監(jiān)控顯色時(shí)間。說明書中所示的顯色時(shí)間可能因?yàn)闇囟群推渌鼨z測條件的不同而稍有變化。
    ⑥ 樣品不適合此檢測：在說明書中會列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍，超出范圍的標(biāo)本可能不適于此試劑盒或者檢測條件需要摸索。
    ⑦ 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品污染：樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的污染可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果“溢值"。
    ⑧ 偶合試劑不正確稀釋：要嚴(yán)格按照說明書來稀釋偶合試劑，濃度過高會造成OD的“溢值"HRP偶合試劑的不正確稀釋
    ⑨ 所用稀釋液不對：只能使用相應(yīng)試劑盒內(nèi)的稀釋液稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
    找到問題原因后，解決問題就容易的多了。各位朋友們也是一樣，在檢測的時(shí)候一定要認(rèn)真仔細(xì)，并嚴(yán)格按照要求來操作。實(shí)驗(yàn)前，對ELISA試劑盒說明書仔細(xì)的閱讀。更多實(shí)驗(yàn)問題可我司技術(shù)人員，上海恒遠(yuǎn)祝大家實(shí)驗(yàn)成功！